过去十年，干细胞和再生医学领域的基础、转化和临床研究的迅猛发展预示着细胞治疗时代已经到来。作为未来的“医学第三大支柱”，干细胞治疗成为其中重要的角色之一。下面我们就一起来看看新闻里你经常听到的干细胞是什么？在干细胞培养制备过程中，Omni箱内成像设备能发挥哪些功效吧？！
干细胞(Stem cell)是人体的原料——所有其他具有特殊功能的细胞都是由干细胞产生的。在体内或实验室的适当条件下，干细胞分裂形成子细胞。这些子细胞要么成为新的干细胞，要么分化成为具有特定功能的特化细胞，如血细胞、脑细胞、心肌细胞或骨细胞等。当我们身体的组织/器官受伤或者病变需要被替换或修复时，就需要干细胞发挥治疗作用。如皮肤的烧伤、烫伤，再或是肝硬化、帕金森等疾病，本质上都是组成器官的细胞受到了损伤，这时可以通过回输干细胞来进行治疗。
为了克服临床应用过程中干细胞来源短缺以及伦理问题，干细胞治疗常通过iPSC重编程技术实现，可不必使用病人自身的细胞，而采用更加健康、有效的现货型细胞，实现细胞的大规模生产，解决应用过程中细胞来源、细胞质量、生产周期等瓶颈问题。iPSC项目中通常涉及到重编程、扩增、工程化改造、分化等多个步骤，时间周期长，容错率低。因此实现稳健的 iPSC 扩增，并长期使其维持未分化状态，需要严格的操作流程和密切的监测。
维持和扩大iPSC培养需要严密的监控，以确保他们下游的多能状态。例如，多能干细胞培养时往往需要保持紧密的细胞集落生长，随着时间的推移，如果没有密切监控，将集落传代的太早或者太频繁，在铺板的时候，细胞聚集体也许会变得不贴壁，导致产率降低；如果传代时间太晚，培养物可能会开始出现分化的迹象。Omni整孔成像可帮助用户密切监测干细胞生长，并确定其最佳传代时间/比率。
将1 million/管冻存的iPSCs复苏后，以不同的稀释倍数种入Matrigel包被过的6孔板中。随后将其放置在Omni多孔板活细胞实时成像系统上，您就可以在培养的同时对iPSCs的生长状态进行不间断的监测啦！
Omni整板成像及AI分析
在明场条件下Omni对6孔板进行整板快速扫描，同时将得到的图像自动上传到云端，进行AI分析。蓝色为AI分析附加的细胞汇合度伪彩，可以精准区分细胞和背景，得到细胞汇合度变化曲线。
在复苏后6-8天，各孔陆续达到最佳传代密度（图中未显示）。柱状图显示复苏后培养第6天，A1孔的细胞汇合度率先达到70%，作为密度最优孔被选择进入下一步传代操作。
维持iPSC的多能性（干性）是其培养成功与否的重要评价指标。Omni活细胞成像系统不仅可以提供整孔成像来全程监测iPSC培养，挑取最佳传代密度和时间点；还可以在双荧光条件下，为用户提供iPSC多能性相关的标记，帮助确认其多能性。
TRA-1-60和SSEA4-1是众所周知的能够表达在iPSC和ECs（胚胎干细胞）表面的标志物，有可能在培养分化过程中丢失。以上图像是用户在iPSC克隆培养第四天，以1:50稀释倍数加入TRA-1-60 Alexa Fluor 488 试剂盒(ThermoFisher, Cat. A25618) and GloLIVE Human/Mouse SSEA-4 NL557活细胞抗体试剂盒(R&D Systems, Cat. NLLC1435R)，与iPSC细胞共孵育30分钟，使得形成荧光复合物。随后放置在Omni活细胞成像系统上，其荧光信号被Omni捕捉到，从而帮助用户确认了其培养的iPSC仍保持着多能性。
拟胚体(EBs)是多能干细胞形成的3D聚集体，介于传统2D和体外分化之间。拟胚体培养时的尺寸、形状、数量等都是评价其同质性的重要指标。借助Omni活细胞成像系统的整孔成像及先进的AI算法，可以在成像的同时，自动定量分析拟胚体的数量、尺寸、面积以及圆度等指标，以确保用户得到一致的、高质量的培养方案。
Omni活细胞成像系统可贯穿干细胞培养、分化以及3D拟胚体全过程，帮您在培养箱中实现7x24小时实时监测，解放您的双手，助您得到准确的传代/质控关键时间点。
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