Spark酶标仪助力AlphaScreen分析

文/ 发布于2023-03-21 浏览次数:1797

以下文章来源于帝肯生命科学 ,作者帝肯生命科学

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AlphaScreen 是一种基于微珠的筛选技术,旨在快速、可靠且经济高效地检测生物分子相互作用,近年来更是广泛的应用于药物研发领域中。同时 AlphaScreen 与 ECL、FMAT技术相似,也需要高能激光器,同其他技术相比,AlphaScreen 对于检测仪器平台要求更高。

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不一样的Spark酶标仪增强型检测模块


高功率激光光源,滤光片优化组合

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Tecan Spark酶标仪配备了增强型检测模块,包括用于优化 AlphaScreen 供体微珠激发的高功率激光光源,以及优化滤光片组合,非常适用于AlphaScreen,AlphaLISA®, AlphaPlex™ 和潜在的新 Alpha 技术应用的发射信号超高灵敏检测。使Spark 酶标仪的增强型检测模块在 96 孔和 384 孔板格式的灵敏度和均一性等基本质量参数方面,均为 AlphaScreen 检测提供了出色的性能保证。

实时温度校正功能

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Spark酶标仪还拥有 Tecan 久负盛誉的实时温度校正功能,可改进微孔板上样品温度波动带来的影响。可用于进一步提高分析性能,而无需在检测前对样品进行耗时的温度平衡过程。

易于操作的软件,优化的实验流程

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Spark酶标仪还为 Alpha 技术集成了易于使用、直观的软件解决方案和预先优化的实验流程,为AlphaScreen, AlphaLISA 和 AlphaPlex 检测保驾护航,为科学研究、分析方法的开发以及高通量筛选等提供了卓越的性能。







眼见为实:AlphaScreen 技术在 Spark多功能酶标仪上的成功应用

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结果



灵敏度和线性度 

Spark酶标仪能够检测低至 1.6 ng/ml 的 Omnibeads 浓度,线性度为 0.9999(R2 值),信号/空白比为 1,154:1(图 2)。

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均一性

将 10,000 ng/ml Omnibeads 稀释液的 50 多份重复的样品移液至 384 孔板中。检测结果表明信号均一性非常好, CV 值仅为 2.2% 。这表明 Spark 酶标仪能够检测 AlphaScreen 信号,且不会产生显著的结果波动(图 3)。

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读取时间

AlphaScreen 在不同微孔板格式中的总读取时间包括激发和积分时间,以及应用温度校正功能所需的时间。通常,我们推荐使用 Alpha检测的标准设置,即激发和积分时间分别为 100 和 300 毫秒,可以在 4 分 28 秒内完成整块 384 孔板的读取。当温度校正功能激活后,基于IR 的温度评估与信号检测会同时进行,因此检测时间会稍微延长。这导致绝大多数特定微孔板格式的读取时间延长约20%。然而, 我们可以通过使用更短的激发和发射周期(激发和积分时间都低至 10 毫秒)来显著缩短总读取时间,同时为个性化应用提供优化方案。


表2 显示了 96 孔板和 384 孔板的 AlphaScreen 读取时间概览。

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参考文献


1) Using the AlphaScreen Omnibeads. www.perkinelmer.com/CMSResources/Images/ 44-73451MAN_AlphaScreenOmniBeads.pdf




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