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General description
可溶性TMB底物,作为单组分系统提供。
过氧化物酶底物,产生可在370nm或650 nm处读取的蓝色可溶性终产物。使用停止溶液可将灵敏度提高两到四倍,并产生可在450 nm处读取的黄色溶液。
Physical form
单组分系统,含有1.46 mM TMB、2.21 mM H₂O₂的专有溶剂,pH为3.1±0.5。
Preparation Note
避免阳光直射。如果溶液变蓝或混浊,则丢弃。试剂在室温下是稳定的,但我们建议将其贮藏在冷冻机中以延长保质期。使用前加热至测定温度。
Other Notes
产品在4°C和18-26°C下进行稳定性测试。通过ELISA对最终产品进行产品性能测试。
在基于HRP的ELISA中使用TMB的建议程序:
1.用抗体和HRP标记的探针完成所有要求的培养。
2.用含有0.1%吐温®-20洗涤剂的磷酸盐缓冲盐水(PBS)或Tris缓冲盐水(TBS)清洗板孔至少4次。
3.**一次洗涤后,摇动并吸干孔中所有残留的缓冲液。
4.向每个孔中加入100 μl TMB溶液培养5-30 min。
5.测量选项:
a.对于动力学分析,可通过在中间间隔读取650 nm处的吸光度,将反应作为时间的函数进行监测。
b.对于保留蓝色色原的终点分析,应通过添加100µl 0.1%氟化钠(NaF)停止反应,并在650 nm处读取吸光度。
c.如果需要提高终点分析的灵敏度,应通过添加100 μl 500 mM H2SO4或250 mM HCl停止反应,并在5 MIN内在450 nm处读取吸光度。添加酸将蓝色自由基转化为黄色二亚胺,其在450 nm处吸收。
注:**培养时间可能因HRP的含量而异。如果颜色展开太快,零级动力学将不占上风。可能需要稀释探针、抗体或HRP标记试剂。时间、试剂体积和温度的变化也可能需要用户进一步标准化。
Legal Information
CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
TWEEN is a registered trademark of Croda International PLC
Disclaimer
毒性:刺激性(B)
| biological source | (Chemical) |
| Quality Level | 100 |
| description | RTECS - DV2300000 |
| form | liquid |
| does not contain | preservative |
| manufacturer/tradename | Calbiochem® |
| storage condition | OK to freeze,protect from light |
| color | clearvery light blue |
| shipped in | ambient |
| storage temp. | 2-8°C |
| SMILES string | Nc1c(cc(cc1C)c2cc(c(c(c2)C)N)C)C |
| InChI | 1S/C16H20N2/c1-9-5-13(6-10(2)15(9)17)14-7-11(3)16(18)12(4)8-14/h5-8H,17-18H2,1-4H3 |
| InChI key | UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N |
| 长度(mm) | |
| 宽度(mm) | |
| 高度(mm) | |
| 重量(kg) |





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