ChIPAb+ REST - ChIP经验证的抗体和引物组,25ASSAYS,17-10456,Sigma

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品牌型号 Sigma 17-10456
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产品介绍 Product Description

General description

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。

ChIPAb+ REST组包括REST抗体,正常兔IgG和扩增人Snap25启动子89 bp区域的对照引物。REST和阴性对照以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能上验证与REST相关染色质的沉淀。
预测值为120 kDa,观测值为200 kDa


Immunogen

表位:氨基酸801-1097
针对对应于人REST的氨基酸801-1097的GST融合蛋白制备REST纯化的抗体。


Application

染色质免疫沉淀:
使用4 µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或4 µg抗REST(产品编号CS207378)和Magna ChIP HiSens(目录编号17-10460)对从HeLa细胞制备的超声染色质(每个IP 4e6细胞当量)进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物,人Snap25(产品编号CS207379)作为阳性基因座,并使用CDC25作为阴性基因座,通过qPCR验证了REST相关DNA片段的成功免疫沉淀。 (图2)。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。

蛋白质印迹分析:
通过电泳分离人HEK293细胞裂解液(30 ug),转移到PVDF膜上并用抗REST(1:1000稀释度)探测。 使用与HRP偶联的二抗和化学发光检测系统对蛋白质进行可视化。 数据由俄勒冈州波特兰市俄勒冈健康与科学大学Gail Mandel的Glen Corson实验室提供。
REST的预测分子量为125 kDa。观察到的大小为~200 kDa。
研究子类别
染色质生物学

组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能
该ChIPAb+REST -ChIP验证的抗体 & 引物组方便地包括抗体 & 特异性对照PCR引物。


Biochem/physiol Actions

可识别REST,预测MW为125kDa,观测值为200 kDa。


Packaging

每组25次测定。推荐用于:每个染色质免疫沉淀约2 μg抗体(取决于生物学背景)。


Physical form

形式:纯化
抗-REST(兔多克隆)。 一个小瓶,包含100 µL 1.0 mg/mL纯化的兔多克隆,溶于含有0.014 M磷酸盐缓冲液(pH 7.6)、0.175 M NaCl、0.07%叠氮化钠和30%甘油的缓冲液中。 储存于-20°C。

正常兔IgG。一个小瓶,包含125 µg兔IgG,溶于125 µL含有0.05%叠氮化钠的储存缓冲液中。 储存于-20°C。

ChIP引物,人Snap25。一个小瓶,包含75 μL 5 μM人Snap25启动子特异性引物。储存于-20°C。
对于: AGA CTC CTT TGC AGA CAA TTT CCT
REV: CAA CAC AGA AGA TTT CCA CAA GTA GAC


Preparation Note

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。处理建议:**次融化后,在取下瓶盖之前,将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中,并储存于-20°C。避免反复冻融循环,以免损坏IgG和影响产品性能。


Analysis Note

对照
包括正常兔IgG和对人SNAP25特异的引物。
染色质免疫沉淀:
使用4 µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或4 µg抗REST(产品编号CS207378)和Magna ChIP® HiSens试剂盒(目录编号17-10460)对从HeLa细胞制备的超声染色质(每个IP 4e6细胞当量)进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物,人Snap25,通过qPCR验证了REST相关DNA片段的成功免疫沉淀。


Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany


Disclaimer

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。


技术参数 Specifications
biological sourcerabbit
Quality Segment100
antibody formpurified immunoglobulin
clonepolyclonal
species reactivityhuman, rat, mouse
manufacturer/tradenameChIPAb+,Upstate®
technique(s)ChIP: suitable,western blot: suitable
NCBI accession no.NP_005603
UniProt accession no.Q13127
shipped indry ice
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高度(mm)
重量(kg)
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