ChIPAb+ 雄激素受体- ChIP经验证的抗体和引物组,25ASSAYS,17-10489,Sigma

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品牌型号 : Sigma 17-10489
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产品介绍 Product Description

General description

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+ 雄激素受体组包括雄激素受体抗体,正常兔IgG和扩增人前列腺特异性抗原(PSA)增强子区域的85 bp区域的对照引物。雄激素受体抗体和阴性对照以可扩展的“每个ChIP”反应大小提供,可用于功能性验证雄激素受体相关染色质的沉淀。
雄激素受体(AR)是一种核受体,通过与雄激素睾酮或二氢睾酮结合而被激活。雄激素受体的主要功能是作为调节基因表达的DNA结合转录因子。然而,雄激素受体还具有独立于DNA结合的其他功能。雄激素受体与孕激素受体关系最为密切,较高剂量的孕激素可阻断雄激素受体。


Immunogen

人雌激素受体1-21位氨基酸对应的肽(MEVQLGLGRVYPRPPSKTYRG)。


Application

染色质免疫沉淀:
将LNCaP细胞激素饥饿72小时,然后用1 µM CI-4AS-1诱导过夜。 使用1 µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或1 µg抗雄激素受体(产品编号CS207339)和Magna ChIP HiSens(目录编号17-10460),对每个IP~1e5细胞当量进行ChIP。 使用ChIP引物,PSA(产品编号CS207379)作为阳性基因座,并使用GAPDH启动子(产品编号22-004)作为阴性基因座,通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀。 数据表示为每个IP样品相对于每个扩增子和ChIP样品的输入染色质的输入百分比。
请参阅Magna ChIP HiSens(目录号17-10460)或EZ-MagnaChIP HiSens(目录号17-10461)方案以获取实验详细信息。

染色质免疫沉淀:
将LNCaP细胞激素饥饿72小时,然后用载体(未处理)或1 µM CI-4AS-1(处理)诱导过夜。 使用3 µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或3 µg抗雄激素受体(产品编号CS207339)和Magna ChIP HiSens(目录编号17-10460),对每个IP~1e5细胞当量进行ChIP。 使用ChIP引物,PSA(产品编号CS207340)通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀,阴性基因座是HNRP2AB1引物组。 报告了报告阳性基因座比阴性基因座富集倍数的Delta Delta Ct计算。
请参阅MagnaChIP HiSens(目录号17-10460)或EZ-MagnaChIP HiSens(目录号17-10461)方案以获取实验详细信息。

蛋白质印迹分析:
该抗体的1:200-1:500稀释液在20 μg人LNCaP细胞的RIPA裂解液中检测到雄激素受体。

免疫沉淀:
代表性批次从500 μg LNCaP RIPA细胞裂解液中免疫沉淀雄激素受体。

免疫细胞化学:
代表性批次的1:50稀释液在用2%甲醛/5%乙酸固定并用0.1%Triton X-100透化的LNCaP细胞中显示出雄激素受体的阳性免疫染色。
ChIPAb+ &雄激素受体组包括&雄激素受体抗体、正常兔IgG & 扩增人前列腺特异性抗原(PSA)增强子区域的85 bp区域的对照引物。
研究子类别
转录因子
研究类别
表观遗传学&核功能


Biochem/physiol Actions

可识别雄激素受体。与雌激素、孕激素或糖皮质激素受体无交叉反应。


Packaging

每组25次测定。推荐用于:每个染色质免疫沉淀约1 µg抗体(取决于生物学背景)。


Physical form

免疫亲和纯化
抗雄激素受体(兔多克隆),产品编号CS207339。 一个小瓶,含有125 µL(0.2 µg/ µL)纯化的兔多克隆,溶于含有0.1 M Tris-甘氨酸(pH 7.4)、150 mM NaCl和0.05%叠氮化钠,然后添加30%甘油的缓冲液中。 储存于-20°C。

正常兔IgG,产品编号PP64B。一个小瓶,包含125 µg(1.0 µg/ µL)兔IgG,溶于125 µL含有0.05%叠氮化钠的储存缓冲液中。 储存于-20°C。

ChIP引物,PSA。产品编号CS207340。一个小瓶,包含75 μL 5 μM每种对人前列腺特异性抗原增强子区域特异的引物。(chr19:51354179+51354263, hg19 build)储存于-20°C。
用于: 5’ GCC TGG ATC TGA GAG AGA TAT CAT C 3’
REV: 5’ ACA CCT TTT TTT TTC TGG ATT GTT G 3’


Preparation Note

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。处理建议:**次融化后,在取下瓶盖之前,将小瓶离心并轻轻混合溶液。分装到微量离心管中,并储存于-20°C。避免反复冻融循环,以免损坏IgG和影响产品性能。


Analysis Note

对照
包括正常兔IgG和前列腺特异性抗原(PSA)增强子区域特异性引物。
染色质免疫沉淀:
使用1 µg正常兔IgG(产品编号PP64B)或1 µg抗雄激素受体(产品编号CS207339)和Magna ChIP® HiSens试剂盒(目录编号17-10460),对用激素饥饿(72H)制备超声染色质,然后诱导(1 µM CI-4AS-1)过夜LNCaP细胞(每个IP约1e5细胞当量)进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物,PSA(产品编号CS207340)通过qPCR验证了雄激素受体相关DNA片段的成功免疫沉淀。
有关实验详细信息,请参阅MagnaChIP HiSens(目录号17-10460)或EZ-MagnaChIP HiSens(目录号17-10461)方案。


Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany


Disclaimer

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。


技术参数 Specifications
biological sourcerabbit
Quality Segment100
clonepolyclonal
purified byaffinity chromatography
species reactivityrat, amphibian, bovine, human, mouse, chicken
manufacturer/tradenameChIPAb+,Upstate®
technique(s)ChIP: suitable,immunohistochemistry: suitable,immunoprecipitation (IP): suitable,western blot: suitable
NCBI accession no.NP_000035
UniProt accession no.P10275
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