用50 μg纯化的质粒测试质粒回收率。回收率>90%且超螺旋形式超过80％。通过从DH5a细胞中分离pBS对质粒DNA的产量进行了测定。从30ml A600密度为在3和6之间的培养物中获得了>85 μg的质粒DNA。

（通过检测A260/A280比例得出）纯度为1.8 + 0.2。

没有检测到RNA。

已经根据目前的质量控制过程测试了试剂盒组分中没有核酸酶。

Application

Genopure质粒中抽试剂盒可从细菌培养液中制备中量级的转染级质粒DNA（**100 μg质粒）。分离的质粒适用于绝大多数分子生物学应用：

转染
Southern blotting
测序
PCR
限制性分析
克隆

Features and Benefits

Genopure质粒中抽试剂盒使用了改良的碱性裂解法制备中等量的高纯度质粒DNA。

使用即用型试剂，节省时间。

最多可纯化20个样品（10分钟手动操作/总共75分钟）。

可纯化所有大小和类型的质粒，

甚至是BAC DNA，因为可以过滤粗裂解物以避免质粒剪切。

可并行处理多个样本

使用高速重力流动柱。

无需使用有害的有机化合物

如氯化铯、苯酚、氯仿和溴化乙锭。

所得质粒DNA的纯度高于

通过2×氯化铯梯度离心制备的质粒。

Preparation Note

分离流程基于改良的碱性裂解法，可分为以下步骤：细菌被部分裂解，使质粒DNA透过细胞壁进入上清液。较大的大肠杆菌染色体DNA被困在细胞壁中。通过过滤或离心，除去裂解物中的细胞碎片，并将含有质粒DNA的组分上样到预平衡柱上。由于净化的裂解物溶于低盐缓冲液后再上样到柱上，使得质粒DNA与柱中的大孔阴离子交换材料结合。用高盐洗涤液从柱上洗脱细胞杂质。 **，从柱上洗脱质粒DNA。将回收的DNA从洗脱液中沉淀出来，以除去盐并浓缩质粒。

Analysis Note

样品：
含有高拷贝数质粒的大肠杆菌培养物：5至30mL细菌培养物
含有低拷贝数质粒的大肠杆菌培养物：100至100mL细菌培养物
质粒大小：分离流程适用于所有大小的质粒。注意：较大构建体（高达100 kb）的裂解液应通过过滤而不是离心来净化，以避免剪切质粒。
所需时间：60分钟（包括过滤裂解液）
一般产量：
高拷贝数质粒：3至5 μg/mL培养物
低拷贝数质粒：0.2至1 μg/mL培养物
产物纯度：分离的质粒DNA不含其他细菌成分，包括RNA。
已对使用该试剂盒纯化得到的质粒DNA进行了限制性酶切消化测试；根据实验方案所述方法从转化HB101中分离得到pUC 19。如琼脂糖凝胶分析所示，在+ 37℃下使用1单位Msp I将1μg质粒完全酶解2小时。

用50μg纯化质粒测试质粒回收率。超螺旋形式大于80%时，回收率高于90％。通过从DH5a细胞中分离pBS，确定质粒DNA的产量。从A600密度为3-6的30 ml培养物中，获得超过85μg的质粒DNA。

纯度（利用A₂₆₀/A₂₈₀比率进行检测）为1.8±0.2。

利用通过标准方法纯化并通过琼脂糖凝胶电泳检测的3 μg pBS分析RNA污染。结果未检测到RNA。

已经根据当前的质量控制流程，检测发现试剂盒组分不含核酸酶。