二氢叶酸还原酶 人，0.25UNIT，D6566-.25UN，Sigma

General description

人DHFR是一种含有186个氨基酸的蛋白质，具有25kDa的表观分子量。它与 大肠杆菌 蛋白质具有30%的同源性，与脊椎动物蛋白质的同源性高达70％。

Application

人二氢叶酸还原酶已被用于：

• 研究绿色荧光蛋白的稳定表达和硫氧还蛋白过氧化物酶-1基因在牛肝菌中的定向破坏
• 研究人二氢叶酸还原酶作为二元复合物的结构分析
• 研究其在酶抑制研究中的体外动力学检测

Biochem/physiol Actions

Km^5,6
NADPH 0.16 mM
7,8-二氢叶酸 0.03 mM
8-甲基蝶呤 0.13 mM
Ki⁷
叶酸 2.6x10-5 mM
甲氨蝶呤 6.1-9x10^-9
二氢叶酸还原酶（DHFR）是胸苷合成中的一种关键酶。它催化二氢叶酸（DHF）还原为四氢叶酸（THF）。它以较低的速度催化叶酸转化为THF。由于胸苷是DNA合成必需的底物，因此DHFR是抗癌药物开发的靶点。甲氨蝶呤是二氢叶酸还原酶抑制剂原型。来自Sigma的酶已被用于杜氏利什曼原虫蝶啶还原酶1（PTR1）的抑制研究。该酶已被用作阳性对照，用于测定从耻垢分枝杆菌中纯化的MS0308蛋白的DHFR活性。
人 DHFR 基因，以及其他哺乳动物的 DHFR 基因，通过基因扩增或氨基酸突变机制克服了甲氨蝶呤的抑制作用。二氢叶酸还原酶（DHFR）可催化NADPH依赖性的二氢叶酸（DHF）还原为四氢叶酸（THF），并以更低的速率将叶酸转化为THF。反应产物THF是通过胸苷酸合成酶将脱氧尿苷酸（dUMP）转化为脱氧胸苷酸（dTMP）过程中的重要辅助因子。它是胸苷合成中的关键酶。 因此，DHFR是DNA合成中的关键酶，并已成为药物开发和癌症治疗的靶标。不同来源的DHFR之间的差异使得研究人员能够开发出种类多样的DHFR抑制剂，例如甲氧苄氨嘧啶（抗菌和抗真菌剂）、乙胺嘧啶（抗原生动物）和甲氨蝶呤； MTX（抗肿瘤药、抗牛皮癣药和抗炎药）。

Physical form

溶于含有10 mM Tris（pH 8）、1 mM EDTA、0.5 mM DTT、5μM NADPH、蛋白酶抑制剂和50％甘油中的溶液中。

Other Notes

在pH 7.5，22°C条件下，一个单元可在1分钟内将1.0μmol二氢叶酸转化为四氢叶酸。