KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒，100UNITS，KK5522，Roche

General description

第二代 KAPA2G Robust DNA 聚合酶的进化解决了广泛扩增子类型（富含 GC 和 AT）的不一致扩增。KAPA2G Robust HotStart PCR 试剂盒能够实现更高的过程性和比活性，这转化为稳健的 PCR 性能、高灵敏度和对常见抑制剂的耐受性改善。KAPA2G 稳健 DNA 聚合酶的高性能非常适合具有挑战性的 PCR 应用和困难的样本，无需使用多种酶和方案进行优化。

Application

KAPA2G Robust HotStart^® PCR试剂盒已用于：

• 唾液样本的PCR扩增
• PCR扩增以便进行直接测序
• 巢式PCR
• 扩增富含 GC 或 AT 的模板
• 含有常见 PCR 抑制剂（例如，盐、尿素、SDS 或乙醇）的模板
• 粗制样本 PCR，例如口腔拭子，培养的哺乳动物、酵母或细菌细胞
• 菌落 PCR
• RT-PCR

Biochem/physiol Actions

KAPA2G Robust HotStart^® DNA聚合酶产生的DNA片段与野生型Taq DNA聚合酶产生的DNA片段相似。KAPA2G Robust HotStart聚合酶的保真度近似于野生型Taq聚合酶；错配率为每1.7 x 10⁵核苷酸约有1个错误。它可用于限制性内切酶消化、克隆和测序。同野生型Taq聚合酶一样，KAPA2G Robust HotStart聚合酶具有5′→3′聚合酶和5′→3′外切酶活性，但不具有3′→5′外切酶（校正）活性。

Features and Benefits

高效扩增富含 GC 和 AT 的靶标

• 在各种 GC 和 AT 富集模板中表现稳健
• 提高 PCR 成功率

• 从粗样品中高效扩增
• 每单位酶的产量和灵敏度更高

• 来自大肠杆菌和酵母细胞的 PCR direct 产量更高，一致性更好

• KAPA2G Robust HotStart PCR Kit 包含 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶，设计用于高处理能力和抑制剂耐受性。
• 纯化的基因组 DNA 和粗样品（例如菌落 PCR）均可用作模板。
• 每 25μ 使用 0.5 UKAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶L 反应。更具挑战性的 PCR（GCrich，粗品）可能需要更高的酶浓度。
• 每个循环使用 15 s/kb 的延伸时间，对于困难的扩增子或模板，增加到 30-60 s/kb。
• KAPA2G 缓冲液含 1.5 mM MgCl₂ (1X)。
• 可使用试剂盒中提供的 25 mM MgCl₂ 溶液添加额外的 MgCl₂。
• KAPA2G 缓冲液 A 针对高产量、高特异性和高灵敏度进行了优化。
• 推荐将 KAPA2G 缓冲液 B 用于抑制剂污染的模板样品。
• KAPA2G GC 缓冲液推荐用于富含 GC 的 PCR ( 70%GC)。
• KAPA 增强剂 1 可与 KAPA2G 缓冲液 A 或 B 一起使用，尤其是用于富含 GC 的检测。
• 反应产物具有 3′-dA 尾式，可克隆至 TA 克隆载体。

Preparation Note

在每次使用前，应确保产品已完全解冻并充分混合。短期使用时，可将试剂保存4°C条件下（最长1个月）。长期储存时，应将试剂放回-20°C环境中。如果所有组分均经过仔细处理且无污染，则在室温下（无意地）短时间（最多3天）放置，预计不会破坏试剂盒。不建议在室温和4°C下长期保存。请注意，储存在高于-20°C的温度下的试剂在使用过程中受到污染时更容易降解，因此在此温度下储存的风险由用户自负。

Analysis Note

每批 KAPA2G Robust HotStart DNA 聚合酶经确认含<2% 污染蛋白 (Agilent protein 230 Assay)。KAPA2G Robust HotStart PCR kits 经过严格的质量控制测试，没有污染的外切和内切核酸酶活性，满足 DNA 污染水平方面的严格要求。

Other Notes

仅用于研究目的。不用于诊断程序。

Legal Information

HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.