默克Neo HPP全自动液压层析柱装柱技术介绍

层析技术早在1903年就应用于植物色素的分离提取，各种颜色的色素从上到下在吸附柱上排列成色谱，也称色谱分离法。随着人们认识和实践的提高以及物理化学技术的发展，应用范围更加广泛，没有颜色的物质同样可用此法分离。在生物化学领域里，层析技术已成为一项常用的分离分析方法。

层析系统由两个相组成：一是固定相，它或者是固体物质或者是固定于固体物质上的成分；另一是流动相，即可以流动的物质，比如水和各种溶媒。

当待分离的混合物随溶媒（流动相）通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，而且随溶媒向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配。与固定相相互作用力越弱的组份，随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动的速度快。反之，与固定相相互作用越强的组份，向前移动速度越慢。分部收集流出液，可得到样品中所含的各单一组份，从而达到将各组份分离的目的。

通过科学合理的方法来装填层析柱并实现高柱效，是柱层析分离技术的关键前提条件。

默克现向全球市场推出了Neo HPP全自动液压层析柱装柱系统，与默克IsoPak^®液压自动柱匹配，可实现全自动的层析柱装柱工作，极大地减少了操作时间和操作误差，并确保高柱效和对称性。

相对于人工装柱的方法，层析柱自动装柱技术有如下特点：

1. ‌自动化和高效性‌：自动装柱系统能够显著提高装柱效率，减少人工操作时间，从而提升整体工作效率‌。

2. ‌减少人为错误‌：自动化系统通过精确的控制和监测，减少了人为操作带来的误差，确保装柱过程的稳定性和重复性‌。

3. ‌提高柱效和对称性‌：采用专利技术设计的分配器和流体仿真系统，能够确保液体在层析柱内的均匀分布，从而提高柱效和对称性‌。

4. ‌降低维护成本‌：自动装柱系统设计使得柱管、筛网和密封圈的清洗与更换更加便捷，减少了维护成本和时间‌。

5. ‌智能操作‌：全自动层析柱通常配备智能操作系统，操作简单易懂，一人即可完成装、卸柱过程，方便快捷‌。

6. 适应性强‌：自动装柱系统可以适应不同直径的层析柱，并且具有多种装柱模式，可以根据具体需求进行调整‌。

下面的篇幅将介绍默克Neo HPP的组成和实现方式：

1. 匀浆罐

2. IsoPak^®自动液压层析柱

3. Neo HPP装柱控制系统

1. 制备浆料

2. 层析柱准备

3. 浆料转移

4. 开始装柱

5. 装柱结束

6. 柱平衡和柱床完整性测定

▸ 根据目标床高和凝胶压缩系数，计算所需的浆料量；

▸ 浆料加入罐中时，同时启动搅拌对悬浮液进行均质化；

▸ 搅拌浆转速可逐渐提高至所需要的转速；

▸ 取样以确定浆料浓度，并将浆料浓度参数输入Neo HPP的软件中（CCP^®平台）。

▸ 操作柱头达到最低高度（可通过程序设定）。确保排气口与大气相通，避免柱内出现任何压力积聚或真空；

▸ 冲洗层析柱底阀与匀浆罐出口阀之间的软管，浆液输送量要考虑到最终浆液浓度；

▸ 确保两个 IsoPak^®阀门的填料入口均已关闭；

▸ 通过底部工艺口将水/缓冲液泵入柱中，直到液体从顶部处理端口流出。泵送量由层析系统控制；

▸ 完成后，层析柱可以进入到下一步的浆料转移。

▸ 打开层析柱底部的 IsoPak^®阀门和匀浆罐出口阀门；

柱头可以以 100cm/h 至 500cm/h 之间的任意速度提升，直至将所需量的填料吸入柱中；

▸ 此过程由Neo HPP全自动装柱控制系统全自动控制，控制平台为默克的CCP^®平台。

▸ 上柱头以设定的速度下降，并到达到设定的柱高；

▸ 此过程由Neo HPP全自动装柱控制系统全自动控制，控制平台为默克的CCP^®平台；

▸ 在整个过程中，层析柱下入口阀关闭，层析柱上出口阀的工艺口打开，浆液缓冲液可通过系统排出。

▸ 到达设定柱高时，上柱头就会停止移动，NEO HPP控制站会将其维持在设定的位置；

▸ 这时可旋转快速锁定螺母，以将上柱头位置完全锁定。

▸ 将层析柱用一定体积的缓冲液平衡（平衡体积根据需求设定 ）后，注入 HETP示踪剂；

▸ 层析柱的平衡和柱床的完整性测定，可由层析系统全自动控制；

▸ 若层析系统为默克的Co-Prime^®系列层析系统，层析柱HETP和对称性测定的配方，可预制在默克的CCP^®控制软件平台中，由默克Co-Prime^®层析系统全自动完成。