号外!!薅羊毛
六一快到了
平日里我们使用qPCR针对于低丰度基因表达水平的分析以及微小表达差异的鉴别,特别是Cq值大于30时,其检测结果的精确度和重现性都急剧下降。数字PCR技术,相比传统的荧光定量PCR,能够使得稀有的核酸序列与大量的背景DNA分开,提高了靶标分子的富集浓度,使检测灵敏度和重现性大大提升[1]。
qPCR的困扰
标曲构建麻烦
如果你需要进行绝对定量,梯度稀释标准品,构建标准曲线费时费力,想直接得到样本的绝对浓度,试用一次dPCR解决您的烦恼。
检测灵敏度低
如果您要进行微量浓度样本检测,或者低丰度突变检出,备受qPCR检出下限的困扰,那升级一下,试用一次dPCR解决您的烦恼。
抑制剂含量高
如果您的样品中抑制剂含量高,环境,土壤,污染水源,重金属物质超标,农药等等疑难样本中需要进行样本检出,qPCR受抑制剂影响,无法检出结果,试用一次dPCR解决您的烦恼。
数字PCR带来的优势
结果准确,更高的灵敏度,重现性更佳
操作便捷,自动化程度高,如果您会操作qPCR,那您就一定会操作数字PCR
省时省力,无需耗时耗力制作标准曲线,还能利用温度梯度优化实验条件
使用性价比高,价格实惠。
QIAcuity纳米微孔板式数字PCR系统将微反应单元制备、PCR扩增和数据读取集成到一台全自动仪器中,整个流程最快2小时内完成。QIAcuity数字PCR系统,一体化,自动化程度高,可解放实验人员的双手,避免由于人工操作而引入的人为实验误差,且有效控制实验成本。
QIAcuity配备有温度梯度功能(如下图所示),搭配高性价比的8.5K纳米微孔板,可实现快速实验条件的优化。
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下图为温度梯度设置界面,快速方便
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下图为,通过测试板,梯度温度设置为64°C至52°C的运行结果,确认最佳温度
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在标准平板上运行测试,选择最佳温度为60°C
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QIAcuity EvaGreen(EG)PCR Kit为通用型试剂盒。搭配特异性更高的QuantiNova LNA PCR Assay,QIAcuity数字PCR系统可以实现低至单拷贝的mRNA和lncRNA的微小表达差异分析,为科学家们提供了更好的选择和体验。
锁核酸 (Locked Nucleic Acid,LNA) 技术,是将寡核苷酸碱基中的β-D-呋喃核糖的2’-O,4’-C位通过缩水形成的刚性结构,增加引物或探针的Tm值,从而实现更短的引物和探针设计。通过锁核酸修饰的引物增强了对互补碱基的亲和力和特异性,即使是微小表达差异也可以轻松检测[2]。
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