ChIPAb+ 单甲基组蛋白H3(Lys9) - ChIP免疫沉淀验证抗体和引物试剂套装,25ASSAYS,17-680,Sigma

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品牌型号 Sigma 17-680
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产品介绍 Product Description

General description

对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+单甲基组蛋白H3(Lys9)套装包括抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体,阴性对照抗体(纯化的小鼠IgG)和qPCR引物(可扩增人GAPDH基因编码区的213 bp)。 单甲基组蛋白H3(Lys9)和阴性对照抗体的规格与ChIP反应次数成比例,可用于功能上验证单甲基组蛋白H3(Lys9)相关染色质的沉淀。
约17 kDa的单甲基组蛋白H3


Immunogen

识别位点:a.a. 1-18
该单甲基组蛋白H3(Lys9)纯化抗体由对应组蛋白H3 1-18氨基酸的合成肽(Lys9单甲基化)免疫获得。


Application

染色质免疫沉淀:
采用2 µg的正常小鼠IgG或抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和Magna ChIP G(目录号17-611)试剂盒,对HeLa细胞来源的、超声处理的染色质(每次IP需1 X 106细胞)进行染色质免疫沉淀。 采用GAPDH编码区引物和GAPDH启动子区对照引物,经qPCR验证单甲基组蛋白H3(Lys9)相关DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。数据表示为每个IP样本扩增子值相对于染色质输入(input)扩增子值的百分比(Percent Input),ChIP样本如图所示。
请参阅EZ-Magna A ChIP(目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案以获取实验详细信息。

蛋白质印迹分析:
前一批次的代表性数据。 将HeLa细胞酸提取物(泳道1)电泳分离,转印至PVDF膜,用抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体(0.5 μg/mL)检测。
用HRP标记的山羊抗小鼠二抗(目录号AP124P)和化学发光检测系统对蛋白显色(如图)。
研究子类别
染色质生物学
研究类别
表观遗传学&核功能
该ChIPAb+验证抗体&引物试剂套装包含抗体、相应IgG阴性对照抗体&PCR对照引物(检测已知阳性位点)。


Biochem/physiol Actions

识别Lys9单甲基化的组蛋白H3,分子量(Mr)17 kDa。
该免疫原序列在广泛的动植物物种中是相同的。


Packaging

25次测定/试剂盒,约2 μg/染色质免疫沉淀


Physical form

抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体(小鼠单克隆IgG2aқ,克隆号CMA306)。一个小瓶,包含50 μg蛋白G纯化抗体,溶于50 μL PBS(含0.05%叠氮化钠)中。 储存于-20°C。

正常小鼠IgG。两个小瓶,包含25 μg纯化小鼠IgG,溶于25 μL储存缓冲液(含0.1%叠氮化钠)中。储存于-20°C。

ChIP引物,GAPDH编码区。一个小瓶,75 μL,人GAPDH编码区特定引物各5 μM。在-20°C下储存。
正向:GGC TCC CAC CTT TCT CAT CC
REV: GGC CAT CCA CAG TCT TCT GG


Preparation Note

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。解冻后分装,避免冻融循环。


Analysis Note

对照
包括阴性对照小鼠IgG抗体和对人GAPDH编码区特异性的对照引物。
染色质免疫沉淀:
使用2 µg正常小鼠IgG或抗单甲基组蛋白H3(Lys9)抗体和Magna ChIP G(目录号17-611)试剂盒,对从HeLa细胞超声制备的染色质(每次IP需1 X 106细胞)进行染色质免疫沉淀。 使用ChIP引物(GAPDH编码区)通过qPCR验证了单甲基组蛋白H3(Lys9)作用DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
有关实验详细信息,请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-409)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。


Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany


Disclaimer

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。


技术参数 Specifications
biological sourcemouse
Quality Segment100
antibody formpurified immunoglobulin
cloneCMA306, monoclonal
purified byusing protein G
species reactivityvertebrates, human
manufacturer/tradenameChIPAb+,Upstate®
technique(s)ChIP: suitable (ChIP-seq),immunoprecipitation (IP): suitable,western blot: suitable
isotypeIgG
NCBI accession no.NM_003493
UniProt accession no.Q66I33
shipped indry ice
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