ChIPAb+ 乙酰化组蛋白H4 - ChIP验证的抗体和引物组,25ASSAYS,17-630,Sigma

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品牌型号 : Sigma 17-630
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产品介绍 Product Description

General description

10 kDa
对每批、每次的全部ChIPAb+抗体的染色质沉淀进行单独验证。 每个ChIPAb+抗体组均包含对照引物(通过qPCR对每个批次进行检测),以在基因座特异性环境下对IP结果进行生物学验证。提供了qPCR方案和引物序列,使研究人员能够在染色质环境中使用我们的抗体时验证ChIP方案。每组还包括阴性对照抗体,以确保ChIP反应的特异性。
ChIPAb+乙酰基组蛋白H4组包括纯化的兔多克隆抗血清和正常兔IgG抗血清,可用于证明乙酰基组蛋白H4抗体能够沉淀与乙酰基组蛋白H4相关的染色质。qPCR引物包括人GAPDH启动子的侧翼,并产生166个碱基对的PCR产物。


Immunogen

针对对应于四膜虫组蛋白H4的氨基酸2-19的肽制备乙酰基组蛋白H4抗血清。


Application

研究子类别
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能
蛋白质印迹分析:
来自正常HeLa细胞(泳道1)和经5 mM丁酸钠处理24小时的HeLa细胞(泳道2)的酸提取蛋白通过电泳分离,转移到硝酸纤维素膜上,并用抗乙酰化组蛋白H4(1:2000)探测。
使用与HRP偶联的山羊抗兔二抗和化学发光检测系统可视化蛋白质。(请参见图)。
该ChIPAb+乙酰基组蛋白H4-ChIP验证的抗体&引物组方便地包括抗体 &特异性对照PCR引物。


Biochem/physiol Actions

基于序列相似性,预测真核生物之间广泛的交叉反应性。
识别约10 kDa的乙酰化组蛋白H4。与四膜虫的乙酰化组蛋白H2B发生交叉反应,与HeLa细胞的乙酰化组蛋白H2B发生弱交叉反应。
可能与其他乙酰化蛋白质发生交叉反应。


Packaging

每组25次测定。每个染色质免疫沉淀约4 μL


Physical form

抗乙酰组蛋白H4(兔多克隆IgG)。一个小瓶含有100 μL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。储存在-20°C。

正常兔血清。一个小瓶含有100 uL抗血清(含0.05%叠氮化钠)。储存在-20 °C。

对照引物。一个小瓶含有75 μL的5 μM人GAPDH特异性引物。


Preparation Note

自收到之日起在-20°C可稳定保存1年。


Analysis Note

对照
包括阴性对照兔IgG抗血清和对人GAPDH启动子特异性的对照引物。
染色质免疫沉淀:
使用4 μL正常兔抗血清或抗乙酰化组蛋白
H4血清和Magna ChIP A试剂盒(目录号17-610),对从未处理HeLa细胞制备的超声染色质(1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀。使用人GAPDH引物侧翼的对照ChIP引物,通过qPCR验证了与乙酰化组蛋白H4相关的DNA片段的成功免疫沉淀(请参见图)。
关于实验详细信息,请参阅EZ-Magna AChIP (目录号17-408)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。


Legal Information

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany


Disclaimer

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。


技术参数 Specifications
biological sourcerabbit
Quality Segment100
antibody formserum
clonepolyclonal
species reactivityeukaryotes, human
manufacturer/tradenameChIPAb+,Upstate®
technique(s)ChIP: suitable,cell based assay: suitable,immunoprecipitation (IP): suitable,multiplexing: suitable,western blot: suitable
NCBI accession no.NP_778224
UniProt accession no.P62805
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