抗-二甲基组蛋白H3(Lys4)抗体,克隆CMA303,100UG,05-1338,Sigma

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品牌型号 Sigma 05-1338
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产品介绍 Product Description

General description

大约17 kDa
组蛋白是高度保守的蛋白质,可作为将核DNA组织成染色质的结构支架。H2A,H2B,H3和H4这四个核心组蛋白组装成一个八聚体(每个分子2个分子)。随后,146个碱基对的DNA被包裹在八聚体周围,形成核小体。组蛋白在翻译后被修饰;而这些修饰调节DNA转录、修复、重组和复制。最常研究的修饰是乙酰化,磷酸化,甲基化和泛素化。修饰主要发生在延伸到核小体核心颗粒之外的N末端和C末端尾巴上。二甲基赖氨酸4组蛋白H3(H3K4me2)是转录激活染色质标记,二甲基组蛋白H3 Lys4(H3K4me2)从具有DNA甲基化的区域中耗尽。多能造血细胞具有差异甲基化的基因子集(H3K4me2+/me3-)。这些基因在转录上是沉默的,并且在谱系特异性造血基因中高度富集,表明H3K4甲基化在分化中的作用。


Immunogen

对应于人组蛋白H3的1-12位氨基酸的合成肽,在Lys4上二甲基化,与KLH偶联。
表位:二甲基化Lys4


Application

染色质免疫沉淀:
使用2 µg正常小鼠IgG或抗二甲基组蛋白H3(Lys4)抗体和Magna ChIP g(目录号17-611)试剂盒,对从HeLa细胞制备的超声染色质(每IP 1 X 106细胞当量)进行染色质免疫沉淀。使用ChIP引物GAPDH编码通过qPCR验证了二甲基组蛋白H3(Lys4)相关DNA片段的成功免疫沉淀。
有关实验详细信息,请参阅EZ-Magna G ChIP(目录号17-409)或EZ-ChIP(目录号17-371)方案。

斑点印迹分析:
用抗二甲基H3(Lys4),克隆CMA303(目录号05-1338,浓度为2.0 µg/mL,稀释度为1:500)探测含有具有各种修饰的组蛋白肽的AbSurance组蛋白H3抗体特异性阵列(目录号16-667)和AbSurance组蛋白H2A,H2B,H4抗体特异性阵列(目录号16-665)。 使用与HRP偶联的驴抗小鼠IgG和化学发光检测系统对蛋白质进行可视化。

ChIP-seq分析:
使用Magna ChIP HiSens试剂盒(目录#17-10460),2 µg抗二甲基组蛋白H3(Lys4)抗体(目录#05-1338),20 µL蛋白A/G珠和1e6交联的HeLa细胞染色质进行染色质免疫沉淀,然后使用磁珠进行DNA纯化。使用标准规程从Input和ChIP DNA样品制备文库,带Illumina条形码适配器,并在Illumina HiSeq仪器上进行分析。在去除TagDust(http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource)标签后,使用Bowtie(http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml)映射了FastQ文件中的超过1600万次读取。使用MACS(http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/)识别峰,并从BigWig和BED文件在UCSC Genome Browser(http://genome.ucsc.edu)中以自定义轨道的形式显示峰和读数。在04-790和05-1338数据集中识别出的**25%峰与HeLa S3的ENCODE H3K4me2 BROAD组蛋白轨迹中识别出的峰有92和90%重叠。

免疫细胞化学:
该抗体已由外部实验室证明适用于免疫细胞化学。

免疫沉淀:
该抗体已由外部实验室证明适用于免疫沉淀。

ELISA:
外部实验室已证明该抗体适用于ELISA。

多路复用:
该抗体可通过Luminex测定特异性识别Lys4上二甲基化的组蛋白H3。
抗二甲基化组蛋白H3(Lys4)抗体(克隆CMA303)是用于检测二甲基化组蛋白H3(Lys4)(也称为H3K4me2,组蛋白H3(二甲基K4))的小鼠单克隆抗体。在ChIP、DB、ELISA、ICC、IP、WB、Mplex中证明其性能。
研究子类别
组蛋白
研究类别
表观遗传学&核功能


Biochem/physiol Actions

基于序列相似性,预期具有广泛的物种交叉反应。
该抗体可特异性识别Lys4上二甲基化的组蛋白H3。抗体结合特异性允许对Thr3进行磷酸化和/或对Lys91进行修饰。


Physical form

在含0.05%叠氮化钠的PBS中κ的纯化小鼠单克隆IgG1。
形式:纯化
蛋白G纯化


Preparation Note

自收到之日起,在2-8°C条件下可稳定保存1年。为了**程度地回收产品,在取下盖子之前,将原始样品瓶进行离心。避免反复冻融,其可能会破坏IgG并影响产品性能。


Analysis Note

对照
HeLa酸提取物裂解液
已通过蛋白质印迹法对Hela酸提取物进行了常规评估。

蛋白质印迹分析:该抗体的2 μg/mL(1:500)稀释液在10 μg HeLa酸提取物上检测到二甲基化组蛋白H3(Lys4)。


Other Notes

浓度:请参考批次特异性浓缩物的分析证书。


Disclaimer

除非我们的产品目录或产品附带的其他公司文档另有说明,否则我们的产品仅供研究使用,不得用于任何其他目的,包括但不限于未经授权的商业用途、体外诊断用途、离体或体内治疗用途或任何类型的消费或应用于人类或动物。


技术参数 Specifications
biological sourcemouse
Quality Segment100
antibody formpurified immunoglobulin
antibody product typeprimary antibodies
cloneCMA303, monoclonal
species reactivityhuman, vertebrates
technique(s)ChIP: suitable,ELISA: suitable,dot blot: suitable,immunocytochemistry: suitable,immunoprecipitation (IP): suitable,multiplexing: suitable,western blot: suitable
isotypeIgG1κ
NCBI accession no.NM_003493
UniProt accession no.Q16695
shipped inwet ice
target post-translational modificationdimethylation (Lys4)
Gene Informationhuman ... H3C1(8350)
长度(mm)
宽度(mm)
高度(mm)
重量(kg)
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