Dispase ® I（中性蛋白酶，I 级），10X~2MG，4942086001，Roche

General description

分散酶是一种中性、速效、温和的蛋白酶，可将完整的表皮与真皮分开。它还将培养的完整上皮细胞与基质分离。它裂解基底膜区，使上皮细胞保持完整。

Application

分散酶^® 用于制备来自多种不同组织和器官的细胞。 该酶已被证明是一种快速、有效但温和的试剂，用于破坏组织的细胞外基质，以释放单细胞用于细胞培养（原代细胞培养）或收获已在培养物中的细胞以转移至新基质（二次培养）。此外，其还可用于防止悬浮培养细胞的不必要聚集。

Biochem/physiol Actions

分散酶^® 是一种非特异性金属蛋白酶。

Features and Benefits

酶活性： = 10U/mg（+ 37°C，底物为酪蛋白，pH 7.5）
抑制剂： EDTA，EGTA，Hg ^{2 +} ，其他重金属。分散酶不被血清抑制。

• 快速、有效、温和的试剂，可释放完整细胞
• 维持细胞膜完整性
• 非哺乳动物来源-无支原体和动物病毒污染
• 对温度、pH 值和血清成分干扰的影响非常稳定
• 易被螯合剂或稀释液灭活
• 提供更高的活性和便利性

Physical form

白色冻干粉，冻干前通过 0.2 μm 过滤m 孔径膜

Preparation Note

2至8 °C储存。（干燥储存！）
激活剂：最适 Ca²⁺ 浓度为 2 mm，酶制剂中含有足够的 Ca²⁺，以达到**活性。
工作浓度： 0.6～2.4 U/mL
工作溶液：贮备液和工作溶液的制备：
为制备 10 mg/mL 贮备液，将冻干分散酶^® I 酶溶于 HEPES 缓冲盐水 (50 mM HEPES/KOH pH 7.4，150 mM NaCl) 中。为制备工作液，用分离细胞的培养基稀释上述贮备液，最终浓度为 0.6-2.4 U/mL。请注意，不建议浓度高于 2.4 U/mL。为获得**结果，使用 0.22μm 过滤器膜。
储存条件（工作溶液）：-15°C 至-25°C
复溶贮备液在 2 ~ 8°C 下可稳定保存 2 周。储存长达 2 个月时，贮备液应等分冷冻。避免反复冻融。
用 PBS 稀释的工作液在 2～8°C 可稳定保存 3 天。

Other Notes

一个单位是在测定条件 (pH 7.5，+37 °C) 下 1 分钟内从对应于 1 μmol (181 μg) 酪氨酸的酪蛋白中释放出叶酸阳性氨基酸和肽的酶活性。
分散酶^®的 RAS 单位与日本文献中引用的 RAS 单位（1,000 至 2,000 分散酶^®单位/ml 的浓度并不少见）的实际比较表明，1 个罗氏分散酶^® I 应用科学单位约等于 416 个日本分散酶单位^®。
1 个单位的罗氏应用分散酶^®等于 181 个蛋白酶单位 (PU)，以 pH 7.5 和 + 37°C 下相当于每分钟每毫升 1 μg 酪氨酸的氨基酸释放量测量。
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。

Legal Information

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.