过氧化物酶 来源于辣根,10MG,P6782-10MG,Sigma

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品牌型号 Sigma P6782-10MG
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产品介绍 Product Description

General description

辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的,属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成,具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca2+ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。


Application

Sigma的酶已被用于开发快速、灵敏且具有长期稳定性的半乳糖氧化酶-过氧化物酶生物传感器,以便检测半乳糖。它已被用作含有3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)的培养基(MRS琼脂板)的组分,用于乳酸菌的生长。TMB是过氧化物酶的显色底物。过氧化物酶将乳酸菌产生的H2O2 催化分解为O2,并且TMB在O2存在下将菌落染成蓝色。因此,在含5% CO2 的空气环境下孵育48小时后,MRS琼脂上产生H2O2 的菌落呈深蓝色。不产生H2O2 的菌落仍为无色。它已被用于研究聚乙烯醇对辣根过氧化物酶的稳定作用。它还被用于测定溶液中的葡萄糖 和过氧化物 。
辣根过氧化物酶(HRP)分离自辣根中(Amoracia rusticana)。 它可用于生物化学应用,如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子(例如蛋白质)的可检测性。 产品P6782是VI-A型,本质上是一种无盐冻干粉。 它被用于定量胆固醇和胆固醇酯,并用于研究水凝胶和硅水凝胶隐形眼镜的体外脂质沉积


Biochem/physiol Actions

HRP容易与过氧化氢(H2O2)结合,生成的[HRP-H2O2]配合物可以氧化多种氢供体。该酶的最适pH为6.0-6.5,在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合,包括使用戊二醛、高碘酸盐氧化、二硫键以及氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记物β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小、更稳定。因此,它是最理想的标记物。同时,其糖基化会产生较低的非特异性结合。已有研究发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸以及 Cd2+、Co2+、Cu2+、Fe3+、Mn2+、Ni2+和Pb2+离子可抑制该酶活性。
辣根过氧化物酶与底物一起孵育时,产生一种有色、荧光或发光的标记分子衍生物,以便可以定量。 辣根过氧化物酶已被证明能抑制cydAB突变,使其突变水平稍微降低。


Packaging

包装单位为mg固体


Preparation Note

本品以1 mg/mL的浓度溶于0.1 M磷酸盐缓冲液(pH 6.0)中,可在室温下保持活性至少两周。该溶液在5次冻融循环后仍保留活性。


Analysis Note

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A403/A275 。 它是血红素含量的量度,而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。
本品使用ABTS测定,以便与其他供应商的单位进行比较:每mg固体约1,000单位


Other Notes

一个ABTS单元将在25°C、pH 5.0条件下每分钟氧化1 μM的ABTS
一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下,在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。
与P8375相似
有关过氧化物酶的更多信息,请访问 www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer。


技术参数 Specifications
typeType VI-A
Quality Level300
formessentially salt-free, lyophilized powder
specific activity≥250 units/mg solid (using pyrogallol),950-2000 units/mg solid (using ABTS)
mol wt ~44 kDa
solubility0.1 M phosphate buffer: soluble 10 mg/mL, clear, orange to red (pH 6.0),H2O: soluble
application(s)diagnostic assay manufacturing
storage temp.2-8°C
SMILES string[O+H2]O[O-]
InChI1S/H2O3/c1-3-2/h1-2H
InChI keyJSPLKZUTYZBBKA-UHFFFAOYSA-N
长度(mm)
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高度(mm)
重量(kg)
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